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從追趕到領(lǐng)跑:體細胞克隆猴技術(shù)的十年

時間:2019-04-09來1源:中國科學(xué)報 作者:佚名

2018年1月,兩只克隆小猴“中中”和“華華”登上國際期刊《細胞》,成了舉世矚目的大明星。這是世界首例非人靈長類動物的體細胞克隆。它們的誕生意味著以體細胞克隆猴為實驗動物模型的時代就此開啟。

一年后,“中中”“華華”又有了5個“兄弟”。它們作為世界首例生物節(jié)律紊亂的體細胞克隆猴模型出現(xiàn)在我國頂級期刊《國家科學(xué)評論》上,再次成為焦點。

“這一成果意味著中國正式開啟了批量、標準化創(chuàng)建疾病克隆猴模型的新時代,對加快新藥研發(fā)等有重要意義。”中科院神經(jīng)科學(xué)研究所(以下簡稱神經(jīng)所)所長、中科院院士蒲慕明說。

用蒲慕明的話說,這樣重大的科研成果,其實是靠一支“精銳小團隊”攻關(guān)出來的。

塞翁失馬

“中中”和“華華”的誕生凝聚了神經(jīng)所蘇州靈長類研究平臺整個研究團隊的精力和神經(jīng)所的多年支持,起名字的過程卻很迅速。

為確保克隆猴成果是國際首例,在兩只小猴順利成長數(shù)日后,團隊負責(zé)人孫強和主要成員劉真仍不敢松懈,忙著處理數(shù)據(jù)、準備投稿。趕文章間隙他們向蒲慕明請教,給這兩只小猴起什么名字好?

“要不你們一人起一個,叫‘強強’和‘真真’?”蒲慕明看了看二人,孫強和劉真連連搖頭。蒲慕明又想了一下,說道:“‘中中’和‘華華’如何?”眾人齊聲說好。

“盡管確定名字只用了幾分鐘,但后來想想,中華復(fù)興的夢想在大家心里已經(jīng)藏了很久。”神經(jīng)所黨委書記王燕總結(jié)道。

而就在兩只小猴出生的前幾個月,體細胞克隆猴團隊的成員剛遇上研究生涯中“最大的一次打擊”。

為確保研究成功,研究團隊嘗試用猴卵丘細胞和猴胎兒成纖維細胞兩種不同的體細胞做克隆。2017年夏天,利用猴卵丘細胞進行克隆的一組有兩只胎兒發(fā)育超過130天,通過剖腹產(chǎn)手術(shù)出生但未能存活。

離成功僅一步之遙,幾名團隊成員心情無法平復(fù),到太湖邊上轉(zhuǎn)了一圈,逼著自己調(diào)整心態(tài)。

幾個月后,利用猴胎兒成纖維細胞進行克隆的一組中,有兩只母猴正常懷孕超過140天并順利誕下胎兒,這才有了前文給兩只小猴起名的一幕。

神經(jīng)所蘇州靈長類研究平臺誕生于2009年。剛建成的那幾年并不順利,曾經(jīng)歷過幾乎沒有研究產(chǎn)出、幾個人照看幾百只猴子的艱難情況,甚至還有抗洪搶險的時候,所做的研究也面臨著激烈的同行競爭。

2012年,蒲慕明一錘定音,給研究平臺定了一個新目標:開展非人靈長類體細胞核移植研究。

“這在當(dāng)時是我們這一領(lǐng)域尚未解決的一大難題。”團隊成員之一、神經(jīng)所研究員劉真告訴《中國科學(xué)報》。

厚積薄發(fā)

克隆需要把受體的卵細胞核取出,注入到異體體細胞核中。猴子作為靈長類動物,其細胞核更精細、更復(fù)雜,克隆起來也更困難,長期以來都不被看好。

團隊研究產(chǎn)出不盡如人意,為何還要接下這塊吃力不討好的“硬骨頭”?這其實是神經(jīng)所布下的一盤“大棋”。

蒲慕明曾直言,發(fā)一篇頂級學(xué)術(shù)期刊文章不算重大科技突破。真正的重大突破應(yīng)該是在原有領(lǐng)域中獲得里程碑式的成果,或是開啟創(chuàng)新的科研領(lǐng)域。“關(guān)鍵是能組織團隊攻關(guān),而不只是自由探索。體細胞克隆猴這個小團隊,就是一個攻關(guān)的例子。”

要做世界第一并非易事。決定開展克隆猴研究后,團隊成員更沉心靜氣,拿出多年積累下的真本事,一點點“蠶食”克隆難題。

孫強曾在云南西雙版納的山上待了將近4年研究試管猴,積累了寶貴經(jīng)驗。

劉真為訓(xùn)練自己的顯微鏡操作水平,曾一天6小時都坐在顯微鏡前,用小鼠胚胎做細胞去核的操作訓(xùn)練。大量練習(xí)后,劉真取卵注核的操作能精確到秒,顯微鏡的機械臂仿佛他自己的雙手一般,一小時取50多個小鼠卵細胞如行云流水。

平臺實驗獸醫(yī)主管王燕,練就了一身辨認猴子的本事:根據(jù)尾巴長短、體型、毛色、胡須,甚至眼睛大小分清每只猴子。每每進入猴房,猴群不但不躲開,反而會乖乖等她抓起尾巴檢查,有些還會主動靠過來。

克隆動物常常會難產(chǎn),平臺獸醫(yī)主管陸勇為在值班時保持清醒,堅持每30分鐘發(fā)一條QQ到工作群,確保自己能監(jiān)控到懷孕母猴的細微變化。

“科研人員要有緊迫感。”蒲慕明表示,體細胞克隆的難題“就是在緊迫感的環(huán)境下做出來的”。

因為團隊成員的這股拼勁兒,原本計劃于2020年攻破的體細胞克隆猴難題在2017年底就見到了勝利曙光。

強則興

蘇州靈長類研究平臺建成至今,團隊從不到10名成員發(fā)展到如今的20余人、1000多只猴子,一直堅守的團隊成員逐漸成長起來。這支團隊也獲得了2018中國科學(xué)院年度團隊榮譽稱號。

2009年,結(jié)束在西雙版納山上的“修行”后,孫強在距上海兩小時車程的西山島上扎下了根。為確保研究盡早開展,孫強以最快的速度選址、招人、租場地,讓實驗平臺初具雛形;為節(jié)約啟動資金,這里的日常交通工具就是電瓶車,實驗室最早只有100多平方米;為盡快鍛煉新人熟悉實驗操作,他們甚至直接在辦公室里養(yǎng)起了老鼠。

“我們想用較少的資源盡可能多地做事。”孫強說。

劉真剛到神經(jīng)所時,還是孫強的一名碩士生,如今這名“土生土長”的博士沒有選擇出國,而是成為平臺的一名課題組組長,開始獨立做一些研究項目。

“神經(jīng)所這個大平臺的支持是一切的基礎(chǔ)。”劉真告訴《中國科學(xué)報》,“我們只要踏踏實實做好手頭的事情,這是很幸運的。”

10年間,王燕見證了整個平臺的從無到有,從當(dāng)年不曾踏出云南的小姑娘,變成了克隆猴輔助生殖實驗領(lǐng)域的“牛人”——她的一臺腹腔鏡微創(chuàng)取卵移植手術(shù)可控制在20至30分鐘內(nèi),一天最高手術(shù)紀錄是11臺,更不用說她多年來與猴子打交道積累下的經(jīng)驗。

對整個團隊來說,掌握非人靈長類體細胞克隆技術(shù)只是開始。作為平臺負責(zé)人,孫強表示,接下來的日子更要“耐住寂寞”。 “從猴子身上能找到的答案有很多,不是一兩項實驗就能完成的,F(xiàn)在的技術(shù)也有很多地方需要完善優(yōu)化。”

“我們未來還有更大的攻堅問題,包括怎樣使用克隆猴技術(shù)建立有用的疾病模型,怎樣真正用在人類疾病治療上。”蒲慕明表示。

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