基因療法如火如荼，然而長期存在的安全性顧慮仍無法接觸。11月17日，國際學(xué)術(shù)期刊《自然-生物技術(shù)》（Nature Biotechnology）在線發(fā)表的一項(xiàng)研究指出，一項(xiàng)針對(duì)患有血友病的狗接受腺相關(guān)病毒（AAV）基因療法的10年研究發(fā)現(xiàn)了可能會(huì)增加肝癌風(fēng)險(xiǎn)的基因組變化。

研究表明，有必要開展進(jìn)一步研究，確定AAV是否會(huì)在極少數(shù)情況下促進(jìn)癌癥。AAV是目前發(fā)現(xiàn)的一類結(jié)構(gòu)最簡單的單鏈DNA缺陷型病毒，在1984年被科學(xué)家提出，可為人體細(xì)胞引入外源DNA。

該研究題為“A long-term study of AAV gene therapy in dogs with hemophilia A identifies clonal expansions of transduced liver cells ”，由美國費(fèi)城兒童醫(yī)院、賓夕法尼亞大學(xué)、北卡羅來納大學(xué)教堂山分校、翰斯·霍普金斯醫(yī)學(xué)院等機(jī)構(gòu)的研究人員聯(lián)合完成，通訊作者為賓夕法尼亞大學(xué)、費(fèi)城兒童醫(yī)院的兒科研究副教授Denise E. Sabatino。Sabatino實(shí)驗(yàn)室的研究集中在血友病上，包括凝血因子VIII變異的研究，以及開發(fā)基于基因的血友病治療方案。

論文寫道，血友病A的基因治療已經(jīng)從老鼠和狗的臨床前研究發(fā)展到在人類身上成功的試驗(yàn)。本世紀(jì)初，科學(xué)家首次在患有血友病A的狗身上研究了AAV載體來傳遞因子VIII基因(F8)。不過，目前AAV基因治療對(duì)血友病A的研究仍處于早期階段。

研究團(tuán)隊(duì)提到，由于重組(r)AAV通常以游離形式存在，rAAV可能無法在細(xì)胞分裂的組織中維持。然而，由于健康犬的肝細(xì)胞通常處于靜止?fàn)顟B(tài)，犬模型非常適合長期研究，這些研究旨在了解AAV基因治療的持久性和安全性。

目前科學(xué)界普遍認(rèn)為AAV載體是安全的，一般不會(huì)將它們自己的基因組插入人類的基因組中，因此成為目前最有前景的基因治療載體。然而AAV也曾面臨一些爭議，幾項(xiàng)小鼠研究即顯示，AAV基因療法載體的基因組整合可以導(dǎo)致肝癌。

Sabatino及其同事用10年時(shí)間研究了接受AAV基因療法的9只狗。通過AAV載體遞送的治療基因會(huì)合成一種叫作凝血因子VIII的蛋白。

研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)，這種治療能在整個(gè)研究期間改善狗的血友病癥狀。他們還研究了AAV載體是否會(huì)將自己的基因組插入狗的基因組，并檢測(cè)到了與細(xì)胞生長和癌癥相關(guān)的基因整合。這類事件中有一些似乎能引起細(xì)胞增殖，這可能會(huì)導(dǎo)致惡性腫瘤。

結(jié)果顯示，其中7只狗在治療后成功穩(wěn)定產(chǎn)生凝血因子Ⅷ。然而其中2只狗在基因治療大約4年后開始出乎意料地上升，在研究快結(jié)束時(shí)達(dá)到了早期水平的3倍。不過，由于最終水平依然遠(yuǎn)低于健康犬，因此被認(rèn)為不具有危險(xiǎn)性。研究團(tuán)隊(duì)在所有這些狗中沒有發(fā)現(xiàn)肝癌跡象。

研究團(tuán)隊(duì)對(duì)其中6只接受治療的狗的肝臟樣本的進(jìn)一步檢測(cè)，共發(fā)現(xiàn)了1741個(gè)獨(dú)特的AAV整合事件，其中44%的整合位點(diǎn)在參與細(xì)胞生長的基因附近。此外，有5只狗的某些肝臟細(xì)胞分裂得比其他細(xì)胞更快，并形成子細(xì)胞團(tuán)塊，存在擴(kuò)增的細(xì)胞克隆。

研究團(tuán)隊(duì)認(rèn)為，他們的數(shù)據(jù)表明，凝血因子Ⅷ在2只狗體內(nèi)的表達(dá)增加可能是由于細(xì)胞的克隆擴(kuò)張所致。他們認(rèn)為，這項(xiàng)結(jié)果支持了血友病A肝靶向AAV基因治療的臨床前景，但同時(shí)基因組變化或應(yīng)引起人們的安全顧慮，有必要對(duì)接受AAV載體治療的患者開展進(jìn)一步研究和長期監(jiān)測(cè)。

值得注意的是，截至目前美國食品和藥物管理局（FDA）批準(zhǔn)的兩項(xiàng)針對(duì)遺傳病的基因療法都使用了這種載體。2017年12月，F(xiàn)DA批準(zhǔn)了由費(fèi)城生物科技初創(chuàng)公司Spark Therapeutics研發(fā)的Luxturna基因療法，治療遺傳性失明。2019年5月，F(xiàn)DA批準(zhǔn)瑞士制藥巨頭諾華公司研發(fā)的Zolgensma療法在美上市，用于治療罕見遺傳病脊髓性肌肉萎縮癥（SMA），同時(shí)創(chuàng)下一劑210萬美元的天價(jià)。

實(shí)際上，圍繞基因治療的安全陰影經(jīng)久未散。1990年，美國正式批準(zhǔn)開展基因治療的人體試驗(yàn)，美國國家衛(wèi)生院的醫(yī)生對(duì)一名4歲的重癥聯(lián)合免疫缺陷病女童進(jìn)行了基因治療，隨后基因治療“火”了近10年。

直至1999年，患有鳥胺酸氨甲酰基轉(zhuǎn)移酶缺乏癥的美國亞利桑那州18歲男孩杰西•基辛格（Jesse Gelsinger）“運(yùn)氣”不夠好，他在美國賓夕法尼亞大學(xué)參加一項(xiàng)基因治療臨床試驗(yàn)時(shí)不幸去世，這是基因治療“開端”之后的第一例死亡案例，這也讓基因療法沉寂十多年。