“我們采用NgAgo技術(shù)，并不是要進(jìn)行重復(fù)或驗(yàn)證，僅僅是把它當(dāng)作一種工具，建立基因敲除斑馬魚模型。”

11月13日，記者聯(lián)系到南通大學(xué)神經(jīng)再生重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室副教授劉東，他電話另一端強(qiáng)調(diào)著這句話。

在11日出版的新一期《自然》雜志子刊《細(xì)胞研究》上，劉東以通訊作者身份發(fā)表論文，報(bào)告了將NgAgo基因技術(shù)用于斑馬魚的研究結(jié)果。當(dāng)天晚上，消息就傳遍國內(nèi)各大學(xué)術(shù)圈。“第二天早上起來一看，我的手機(jī)都快被各種消息擠爆了。”

一篇論文為何引起這么大的反響？圈內(nèi)人士告訴記者，雖然是發(fā)表在《自然》雜志子刊上，但這樣的轟動(dòng)效應(yīng)還是從來沒有過的，原因只有一個(gè)，劉東采用了廣受學(xué)術(shù)界質(zhì)疑的NgAgo基因技術(shù)。這是自韓春雨之后，中國研究人員發(fā)表的有關(guān)NgAgo基因技術(shù)的第二篇學(xué)術(shù)論文。

今年5月，河北科技大學(xué)韓春雨團(tuán)隊(duì)在《自然》雜志子刊《自然·生物技術(shù)》上首次發(fā)表關(guān)于NgAgo基因技術(shù)的論文，全球?yàn)橹�轟動(dòng)。但隨后，多名國內(nèi)外學(xué)者公開表示無法重復(fù)論文中描述的實(shí)驗(yàn)，從而引發(fā)爭議。

“各路媒體，甚至還有許多國外雜志找到我，讓我發(fā)表對(duì)韓春雨和NgAgo技術(shù)的評(píng)價(jià)，這真是讓我們很苦惱的問題。”劉東說，客觀地來看，從學(xué)術(shù)角度確實(shí)無法評(píng)價(jià)，“我們用不同的系統(tǒng)，也沒有重復(fù)他的實(shí)驗(yàn)，僅僅是都用了NgAgo這樣一個(gè)蛋白質(zhì)而已，無法做任何關(guān)聯(lián)和討論”。

劉東告訴科技日?qǐng)?bào)記者，他主要從事的是血管新生方面的研究，“利用多種遺傳操作技術(shù)建立轉(zhuǎn)基因和基因敲除斑馬魚模型”在實(shí)驗(yàn)室主頁關(guān)于他本人的研究領(lǐng)域介紹中排第三，也就是說，這只是他的一項(xiàng)“副業(yè)”——利用這些模型來研究血管新生。

在此次發(fā)表的論文中，劉東敲低的基因是fabp11a，并因此導(dǎo)致斑馬魚眼部發(fā)育缺陷。“這與血管新生沒有直接的聯(lián)系。”他直截了當(dāng)?shù)馗嬖V記者。

但是在實(shí)驗(yàn)之初，劉東確實(shí)是想利用NgAgo技術(shù)進(jìn)行基因敲除，而不是敲低。敲除和敲低盡管只有一字之差，但卻是完全不同的兩個(gè)學(xué)術(shù)概念。

基因敲除是去除不想要的基因，使目標(biāo)基因永久性地表達(dá)沉默；而基因敲低則保留目標(biāo)基因，只是阻斷目標(biāo)基因的表達(dá)，但在下一代生物體內(nèi)依然能夠進(jìn)行基因表達(dá)。敲除是基因編輯的功能之一，而敲低不是。

在5月開始的實(shí)驗(yàn)中，劉東想要完成的基因敲除沒有實(shí)現(xiàn)，但是卻意外收獲基因敲低這一結(jié)果。為了確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，整個(gè)實(shí)驗(yàn)持續(xù)了5個(gè)多月，直到投稿時(shí)實(shí)驗(yàn)仍然在持續(xù)。

他們發(fā)現(xiàn)，NgAgo的存在，使30％的斑馬魚胚胎在發(fā)育后出現(xiàn)了眼部畸形，但這不是基因編輯的結(jié)果。測序發(fā)現(xiàn)，fabp11a的基因沒有發(fā)生任何變化，反倒是fabp11a mRNA的相對(duì)表達(dá)量下降了約50％。fabp11a沒有被編輯，但被敲低了。

NgAgo對(duì)fabp11a mRNA表達(dá)的下調(diào)只是一個(gè)意外嗎？為了驗(yàn)證這一點(diǎn)，研究人員又對(duì)斑馬魚中的其它4個(gè)基因進(jìn)行了測試。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，NgAgo都能實(shí)現(xiàn)敲低作用。因此，他們得出結(jié)論：NgAgo的敲低作用是具有普遍性的。

“從實(shí)驗(yàn)中看，NgAgo的基因敲低效率（比傳統(tǒng)方法）更高。”劉東說，不過他也補(bǔ)充說，這一觀點(diǎn)并不是很嚴(yán)謹(jǐn)，畢竟測試的基因數(shù)量很少，方法也不是很系統(tǒng)。

盡管如此，劉東還是很肯定地表示，沒有在NgAgo中重復(fù)出基因編輯功能。“我們認(rèn)為gDNA/NgAgo為斑馬魚中的基因敲低提供了一種替代方案。”在論文中，劉東和他的伙伴們這樣寫道。

對(duì)于未來會(huì)不會(huì)繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)中研究觀察NgAgo技術(shù)，劉東說：“這不是我的主要研究方向和興趣，是否進(jìn)一步研究還不確定。”（科技日?qǐng)?bào)南京11月13日電）